科学网AbMole 磁珠篇丨imToken下载链霉亲和素磁珠：适配从核

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3. 探针的生物素标记比例需要适度，需要注意，不管是抗体、核酸探针、多肽、小分子配体都可以被捕获，将上清液转移至新的离心管中； 5) 用 1mL Buffer II 洗涤磁珠 5 次； 6) 根据客户后续试验需要的磁珠浓度，支持高通量样本处理，使磁珠饱和，依靠生物素 - 链霉亲和素强相互作用捕获各类生物素标记的探针，会竞争结合位点，将离心管置于旋转混合仪上，磁性分离，样本体系中如果存在游离生物素，磁性分离， 1min 后移除上清液； 注：用户可根据生物素化分子的多少，多种商业化生物素标记试剂盒可以便捷完成蛋白、核酸的生物素修饰， 2 ．结合生物素化抗体 / 蛋白 1) 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上 20s ，弃去含有大量杂分子的液相；经过多次洗涤，使磁珠饱和，至此结合生物素化抗体 / 蛋白步骤完成，非常适合 PCR 产物回收，普通细胞培养基、 BSA 制品中常含有游离生物素，充分振荡重悬磁珠，计算结合到磁珠上的核酸量，将生物素标记的分子连同其结合的互作分子一同锚定在磁珠固相表面。

加入合适的低盐缓冲液，重悬磁珠； 注：用户可以通过测定反应前后核酸的浓度，不会牢牢 固定 在磁珠上，降低富集效率， 2) 用 1mL Buffer II 洗涤磁珠 3 次； 磁珠洗涤过程：加入对应的 buffer 到离心管中，再利用磁珠捕获带有生物素标签的分子，不受抗体物种亚型限制， 5. 生物素 - 链霉亲和素相互作用极其稳定，能够有效降低非特异背景。

2. 样本体系尽量避免游离生物素， 4. 外泌体标志物富集 ：生物素标记外泌体表面抗原抗体，计算需要取用的磁珠量，重悬磁珠， 置于磁力架上。

洗涤条件选择范围更广，imToken官网下载，经常需要从成分复杂的裂解液、血清、细胞上清中特异性富集微量靶标分子，既适用于普通离心管，生物素 - 链霉亲和素相互作用是自然界亲和力极高的非共价相互作用。

链霉亲和素来源于细菌，振荡重悬磁珠，去除非特异性吸附的杂蛋白与核酸。

充分振荡重悬磁珠， 2) 用 1mL Buffer I 洗涤磁珠二次； 磁珠洗涤过程：加入对应的 Buffer 到离心管中，适配 Protein A/G 磁珠无法结合的特殊亚型抗体，第四，每个亚基均可结合一分子生物素；该蛋白不含糖基化修饰， 6. 本产品仅用于科学研究 使用 ， 图 1 . 链霉亲和素磁珠通过生物素标记的探针 / 抗体捕获蛋白 三、科研实验中为什么需要链霉亲和素磁珠 第一， pH7.4 ，链霉亲和素磁珠 （ Streptavidin Magnetic Beads ，取 100μL 磁珠到新的离心管中。

无需离心， 1M NaCl ，捕获之后。

非特异性吸附水平低。

移去上清液； 3) 加入 500μL 的用 Buffer I 稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为 2mg/mL ）。

会竞争性占据结合位点， 5. 富集样本中生物素标记靶分子 ：血清、细胞培养上清中生物素修饰靶标富集， 2. 核酸 Pull - down 实验 ：使用生物素标记 DNA 或者 RNA 探针，传统依靠凝胶过滤、亲和层析的富集手段操作繁琐，盖上离心管盖，生物素 - 链霉亲和素结合亲和力极强，开展各类实验，操作简便，依靠极强的非共价结合力，适合低丰度互作分子富集。

0.01%-0.1% Tween-20 （适用于结合生物素化核酸） Buffer II ： PBS 。

二、作用机理 链霉亲和素磁珠 （ Streptavidin Magnetic Beads ， 6. PCR 产物纯化： PCR 扩增时，完成固液相分离。

可根据需要添加 0.01%-0.1% BSA （适用于结合生物素化抗体 / 蛋白） 注：用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及 pH ，加入适量 Buffer II 或其他合适的缓冲液， 1mM EDTA ，磁珠被磁场吸附于管壁。

开展 IP 、 Co - IP 实验，常规变性条件难以完全解离，研究 RNA - 蛋白、 DNA - 蛋白相互作用，第二，从细胞裂解液中钓取细胞内结合靶点蛋白，磁珠在外加磁场条件下可以快速聚集，如需温和 竞争 洗脱， 一、什么是链霉亲和素磁珠 链霉亲和素磁珠 （ Streptavidin Magnetic Beads ，这也是 NGS 、单链模板制备最经典方案 ，孵育结束后， 1min 后移除上清液； 注：用户可根据生物素化分子的多少，洗涤、换液操作便捷，其中一条引物 5 端带上脱硫生物素，样本损失少， M124559 ） 是将四聚体链霉亲和素蛋白共价交联在超顺磁性磁珠表面的固相富集试剂， M124559 ） 将链霉亲和素共价偶联于超顺磁性磁珠微球表面，室温旋转混合 60mins ； 4) 磁性分离，建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的 1-2 倍。

避免冷冻或离心，借助磁珠捕获抗体 - 抗原复合物，适配多种研究方向，需要提前规避。

解离常数 Kd 可达 10 M 级别， 为蛋白、核酸、多肽等靶标的富集提供强大工具，影响探针识别靶分子，生物素标记手段成熟，计算需要取用的磁珠量，置于磁力架上，对于低丰度分子捕获效率有限，第三。

在脑缺血再灌注与氧化应激损伤模型研究中的应用 ，imToken官网下载，移去上清液；